中文名称:三羟甲基氨基甲烷
英文名称:Tris;Tris(hydroxymethyl)aminomethane。
Tris是一种有机化合物,其分子式为C4H11NO3。它在水中溶解度高,对很多酶反应是惰性的,具有很高的缓冲能力,并且对生物化学实验过程的干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀,使得Tris成为非常优秀的缓冲液制备材料。
(Tris结构式)
在室温(25℃下),它的pKa为8.1。根据缓冲理论,tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0-9.2之间。0.1mol/l的水溶液pH为10.4。但其本身为弱碱,一般加入盐酸以调节pH值,即可获得所需pH值的缓冲液。其pH值随温度变化很大,一般来说温度每升高1°C,pH 值下降 0.03 ,浓度每稀释 10 倍,pH 降低 0.03-0.05 个单位。 精确应用时应使用带有玻璃/甘汞复合电极,经仔细校正的pH计。
主要应用:
1. 1M Tris-HCl 6.8、1.5M Tris-HCl 8.8和是SDS-PAGE最常用的试剂,与生理体液的相容性好。
2. 在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”,TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。将调节pH值的盐酸换为乙酸即可以得到“TAE(Tris/Acetate/EDTA)缓冲液”,换成硼酸则获得“TBE(Tris/Borate/EDTA)缓冲液”。TAE和TBE缓冲液常用于核酸电泳实验中。
3. Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长(作为蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用Tris)。Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans)核纤层蛋白(lamin)的中间纤维的形成。
4. 此外,Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物,也被用作滴定标准物。
注意事项:易吸收空气中的CO2,所以配制的缓冲液要盖严密封;对某些pH电极有一定干扰作用,要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。
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