液相C18柱

液相C18柱
液相C18柱是一种常用的反相柱，在分离和纯化有机化合物时起着重要作用。以下是液相C18柱的使用方法的详细步骤：
一、准备工作：
1.检查柱的状态，确保检测床不破裂或损坏。
2.将柱底和柱顶连接好，并确保连接口密封良好。
3.检查并配置用于柱操作的溶剂。常用的溶剂包括乙腈、甲醇和水。
二、柱的装载和平衡：
1.使用合适体积的溶剂使得柱填充物湿润。
2.把待分离样品按照所需浓度稀释，并通过滤膜或其他方法过滤掉杂质。
三、将样品注入柱上。
使用纯溶剂进行柱的平衡，直到样品溶剂通过柱时不含有待测物。
四、样品的注入：
1.选择合适的进样方式，如手动注射器或自动进样器等。
2.根据所需的分离效果和分离速度，确定进样量。
五、溶剂梯度流动：
1.确定合适的溶剂梯度流动方案。一般来说，起始时使用弱极性溶剂，然后逐渐增加强极性溶剂的比例。
2.控制溶剂流动速度以及梯度变化的速度。
六、离心洗脱：
1.当样品组分出现在柱床上时，可以通过调整溶剂梯度或运行时间来优化分离效果。
2.根据分离和纯化目的，确定适当的洗脱段时间。
3.通过监测样品的吸光度、色谱峰的强度或质谱图，确定z佳洗脱时间。
七、柱的保存和维护：
1.在使用完毕后，用纯溶剂进行柱洗涤，以去除残留的样品和溶剂。
2.从柱底逆流通入体积约为1-2倍柱的溶剂，并保持一段时间让柱充分湿润。
3.在储存之前，使用合适的保护剂封存柱，避免填充物的污染。
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