酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。从原理上可以分为光栅型酶标仪和滤光片型酶标仪。光栅型酶标仪可以截取光源波长范围内的任意波长,而滤光片型酶标仪则根据选配的滤光片,只能截取特定波长进行检测。适用于酶联免疫吸附试验、细胞培养分析、免疫、转基因产物鉴定,以及医学临床诊断、血凝试验分析等。
96孔酶标仪操作注意事项:
1.添加样品:将样品稀释液添加到涂层板上,用PBS或生理盐水按1:20的比例稀释待测血清,然后向微孔板的反应孔中添加10ul。
2.添加对照:添加3孔阴性对照,1孔阳性对照和100ul对照血清。
3.孵育:摇动反应板以使样品充分混合,然后将其置于37°C的培养箱或水浴中20分钟。
4.洗涤板:用蒸馏水将15ml洗涤溶液稀释至300ml。用手洗涤时,应倒出反应板孔中的内容物,并用洗涤液充满孔中的位置,然后静置30秒以使其剧烈摇动。重复此操作5次,然后拍干。机洗需要执行5次。可以将200ul洗涤溶液注入每个孔中或将其充满,然后放置30秒钟并吸干。
5.添加酶标记的工作溶液:向每个孔中添加100ul酶标记的工作溶液,放置在37°C的培养箱中,反应20分钟后洗板5次。洗涤板的操作与上述步骤4相同。
6.显色和反应终止:将50ul底物添加到反应孔中,并在37°C的黑暗中显色10分钟。停止每个孔的溶液并混合以终止反应。
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