显微镜分辨率指的是显微镜对细节进行区分的能力,换句话来说,这是样本内两个能被观察人员或者显微镜摄像头区分的实体点之间的理想的距离,显微镜的分辨率与光学元件的数值孔径NA)以及用于观察样本标本的光波长有关。
数值孔径NA)与光通过的介质的折射率n)以及给定物镜的孔径角α)有关NA=n × sin α)。显微镜的分辨率不仅取决于物镜的NA,还取决于整个系统的NA,要把显微镜聚光镜的NA也纳入考虑。在显微镜系统中,所有光学元件都正确对齐、具有相对较高的NA值并且相互协调工作,可以分辨出更多的图像细节。分辨率还与标本成像所用的光波长有关;波长越短,可分辨的细节越多,波长越长则分辨细节越少。
显微镜分辨率的计算公式为σ=λ/NA
式中σ为**小分辨距离;λ为光线的波长;NA为物镜的数值孔径。可见物镜的分辨率是由物镜的NA值与照明光源的波长两个因素决定。NA值越大,照明光线波长越短,则σ值越小,分辨率就越高。
如何提升显微镜的分辨率:
1、降低波长λ值,使用短波长光源。
2、增大介质n值以提高NA值NA=nsinu/2)。
3、增大孔径角u值以提高NA值。
4、增加明暗反差。
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