Tris-HCl缓冲液是指三羟甲基氨基甲烷与盐酸组成的缓冲溶液,是生化实验中应用非常多的一种生物缓冲剂。市场上实际有两种类型,一种是Tris盐酸盐粉末试剂,一种是Tris和不同比例的HCl配置成的不同pH值的溶液试剂。
Tris-HCl粉末试剂与溶液试剂并不只是粉末与溶液的差别,其粉末试剂溶于水后形成溶液与成品溶液试剂在使用上也是有区别的。原因是三羟甲基氨基甲烷分子结构(HOCH2)3CNH2中含有一个氨基,与盐酸生成盐呈1比1反应,不过粉末产品中可能会有少量没有与盐酸反应完全Tris碱。
Tris、Tris盐酸盐、Tris-HCl缓冲溶液即用型pH值区别:
1. Tris或Tris碱pH值为10-12,呈弱碱性;
2. Tris盐酸盐pH值为4-6,呈弱酸性(有些产品为Tris与其盐酸盐的混合粉末,pH会有所上升);
3. Tris-HCl缓冲溶液通常是按一定的Tris与HCl比例配置好的即用型缓冲溶液,pH值取决于两者比例,常用的有7.4,7.6,8.0,8.8等,一般呈近中性,偏弱碱性。
配置溶液时的区别:
Tris配置缓冲液时需要搭配酸一起使用,不仅是搭配盐酸使用,还可以组合成其它缓冲体系,比如Tris-磷酸,Tris-硼酸、Tris-醋酸、Tris-甘氨酸等。使用起来比较自由,应用也要更为广泛一些。常用浓度有0.1mol/L,0.05mol/L。
Tris盐酸盐粉末试剂,pH通常是固定的,使用时直接溶于去离子水即可,非常的方便,一步到位,节省时间。Tris的pKa为8.1;根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间,粉末试剂可以混合Tris粉末使pH调节至近中性。盐酸常温下是液体,而且易挥发,储存和运输不如粉末试剂方便。
即用型Tris-HCl缓冲溶液,这个不需要配置了,采购时根据需要买对应pH的试剂就行。这个使用起来是z快的,不过市场上产品的pH值是固定的几个值,如果需要某一特定的pH,会比较难找,可能还是自己配置,这样就得不偿失了。
需要注意的是,不管是哪一种类型的Tris试剂,都有几个相同的特点:Tris对温度敏感,因此调节pH时需控制在室温;浓度改变对pH有显著影响,缓冲液稀释过度会改变pH值,降低缓冲能力;容易吸收空气中的CO2,要做好密封工作。
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