三羟甲基氨基甲烷Tris饱和酚和水饱和酚的区别

Tris（三羟甲基氨基甲烷）作为一种常用的生物缓冲剂在生物化工领域有非常广泛的应用，比如核酸纯化，而饱和酚在核酸纯化中有2种，一种为Tris饱和酚，也称为碱性酚、Tris平衡酚(Trissaturatedphenol或Trisbalancedphenol)，是用Tris-ClpH8.0饱和过的重蒸酚，为浅黄色透明液体，有刺激性气味，上层为Tris盐酸缓冲液，溶液内加有抗氧化的8-羟基喹啉。适用于从核酸样品中去除蛋白质，提取DNA等。
Tris饱和酚一般PH大于7.8，其中，酚是强的蛋白变性剂，可以使细胞或组织中的蛋
白质变性析出。而Tris的主要作用是防治止酚类氧化，若酚类氧化，则会形成醌（两个苯
环），醌含有强自由基，会破坏核酸结构。同时，由于PH值大于7，在碱性环境中DNA处于水相，RNA处于有机相。从而分离上清，即可得到DNA。

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另一种就是酸性酚，也就是水饱和酚,用于提取RNA。又叫水平衡酚(Water Saturated Phenol 或Water balancedphenol)。水饱和酚的PH一般4.7-5.5，通常与异硫氢酸胍(或0.1%, 0.2%β-巯基、乙醇)一起使用，用于细胞RNA的提取，这样DNA在酚相，RNA 在水相。两者就分开了。
Tris饱和酚的配置：
1、冰箱取出重蒸酚，室温放置至68度水浴溶化，切勿立即放入68度的水浴中，以防玻璃炸裂；
2、加8－羟基喹啉至0.1％和β－巯基乙醇至0.2％，（原液14.4MOL/ML），混匀，溶液呈现黄色，倒入分液漏斗中（也可在烧杯中进行）；
3、加入等溶剂的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反复混匀后，静至分层；放出下层黄色酚液，弃上层；
4、加固体Tris约1g/100ml酚，摇匀，去水相；
5、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)平衡数次，至PH为8.0；
6、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)于棕色瓶中，4度保存；
7、如黄色消失或呈粉红色（说明酚已经被氧化），则不能使用。
重蒸酚为白色针状结晶体，有较强的腐蚀性，应尽量避免皮肤接触或吸入体内。如发现变为红色或棕色，表明发生氧化，不能使用。保存条件需要在-20℃下避光保存。Tris饱和酚为有毒、刺激性物体，需要在通风橱中操作。